调节性T细胞（T-Reg细胞）的实验流程(2)

2.4混合并在冰箱（28℃）黑暗中孵育10分钟。
2.5在400 g条件下，4℃下将细胞离心5分钟。（离心前，请勿在固定/烫发混合物中添加任何其他缓冲液）
2.6去除（脱蜡）上清液。
2.7添加50L冷阻缓冲液。
2.8添加50L冷PBS。
2.9混合并在冰箱（28℃）的黑暗中孵育5分钟。
2.10加入5μl FoxP3 APC试剂。
2.11混合并在冰箱（28℃）的黑暗中孵育30分钟。
2.12. 用2ml冷PBS冲洗细胞两次，在400 g下离心5分钟，4℃。吸入/脱出上清液。
2.13. 在PBS中加入300l 1%甲醛，并将染色样品存放在28℃下，直到流式细胞仪测定。4小时内分析处理样品。
结果展示：
使用TregFlowEx试剂盒中对人CD4阳性淋巴细胞进行流式细胞术多色染色。 Treg细胞（CD4 CD25 FOXP3 ）位于右上象限。

文章来源：每日生物评论
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