脑声常谈:悬尾实验(Tailsuspensiontest,TST)测试方法总结(2)
2023-05-01 来源:飞速影视
2) 将动物轻柔地从笼中拿出来,以最快的速度将其尾巴固定好,不得给小鼠造成多余的压力和应激状态。具体操作为用医用胶带粘在距离尾巴尖端 1 cm,以便将动物的尾巴从装置悬挂杆上悬吊下来。动物尾巴尖端与地面之间的高度约为 30 cm,使小鼠呈头倒式位。
3) 摄像镜头需提前调好,将其调到水平对准小鼠身体的位置,以便录像可呈现完全的视野。
4) 实验总共需录视频 6 min,录像记录动物实验期间的行为,但记录后4min动物的不动时间。
5) 记录时长完成后,撕去医用胶布将实验动物小心取下来,并放回原笼中做好记录。
6) 所有动物测试完成后,及时清理仪器中的粪便和尿液。
主要的指标及行为学意义:
1) 肢体不动:当动物停止挣扎时,身体保持垂直倒悬状态,静止不动,这个指标可视为实验动物出现习得性无助后放弃挣扎的行为表现。动物在悬尾实验中的不动时间越长,表明动物的抑郁程度越重。
2) 挣扎行为:当动物出现企图挣扎、起身时的行为,动物的挣扎时间越短,表明动物的抑郁程度就更重。
数据如何统计:记录实验动物的挣扎行为和不动时间,一般换算为以秒为单位的计量。通过与对照组进行对比,一般使用T检验即可,至于是否选择配对或未配对则需要跟自己的实验目的来选择,此处不展开说明。
实验注意事项(测试时长、是否可重复、大小鼠的差异、品系)
1.胶带要缠在接近动物尾巴尖端的地方,不要缠在靠近尾巴根部的地方,这样会影响动物的活动。若太靠下动物的挣扎与活动会受到限制,影响实验结果。
2.背景板要与动物的颜色形成强烈反差,以便软件识别。例如用白色小鼠时,需要选用黑色的背景板,以便视频录制清晰,易分辨;反之亦然,用黑色的c57小鼠进行实验时,则需要考虑用白色的背景板来完成衬托和凸显。
3.不同品种的小鼠悬尾实验表现不同:例如空白对照组c57小鼠不动时间较长,均值多大于100s; 空白对照组的ICR 小鼠不动时间均值多小于100 s; 抑郁行为判断标准:不动时间与对照组相比有显著性增加(P < 0. 05)即可,并不需要单纯比较不动时长。
4.悬尾实验并不建议用较重的大鼠,因为大鼠只能通过它们的尾巴来支持它们的体重,这对大鼠来说是痛苦的。同样的道理,应该注意避免使用异常重的小鼠(例如用于模拟肥胖的小鼠),在这种情况下,实验者应该寻找替代性的测试,例如强迫游泳实验。
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