植物赖氨酸含量的测定(茚三酮显色法)-赖氨酸含量的测定
2024-09-26 来源:飞速影视
蛋白质中赖氨酸(lysine,Lys)的含量是谷物品质的主要指标之一。由于动物及人类不能合成,须从食物中得以补充,为此培育高含量赖氨酸的谷物,对于提高营养价值有重要意义。本文介绍了使用茚三酮显色法来检测谷类作物种子中赖氨酸含量的原理、实验流程以及实验注意事项,欢迎收藏。关于染料结合法(DBL)可以参考《谷类作物种子中赖氨酸含量的测定-染料结合法(DBL)》
一、原理-植物赖氨酸含量的测定(茚三酮显色法)-赖氨酸含量的测定
谷物蛋白中赖氨酸残基有自由的ε-NH2,它与茚三酮(ninhydrin)试剂可发生颜色反应,生成紫红色物质,其颜色与赖氨酸残基的数目成正相关。
选用碳原子数目与赖氨酸相同的亮氨酸,配成标准溶液,做出标准曲线,可用以测定谷物蛋白内赖氨酸的含量。
二、材料、仪器设备及试剂-植物赖氨酸含量的测定(茚三酮显色法)-赖氨酸含量的测定
(一)材料
不同品种的玉米种子,用粉碎机粉碎,过100目筛子,收集过筛后的细粉,放人广口瓶内,加人沸程60~90C的石油醚,使其淹过粉面,浸泡8h,不时搅动进行脱脂。然后过滤,并用石油醚淋洗沉淀若干次,弃去滤液。将脱脂玉米粉晾在干净的滤纸上,置阴凉通风处吹干石油醚。收集干粉,置干燥器内,保存备用。
(二)仪器设备
722型分光光度计,水浴锅,试管,圆头玻璃棒(圆头大小要与试管大小配套)。
(三)试剂
(1)缓冲溶液,称取30g甲酸钠,溶解于约60mL蒸馏水中,加入10mL8%的甲酸,*后加水到100mL。
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