咖啡馆的命运邂逅:两位女性一起剪切生命密码,又一起获得诺奖(5)
2023-05-20 来源:飞速影视
波多黎各咖啡馆里,改变人生的聚会
在会议的第2天,她们恰巧在一家咖啡馆碰了面。杜德纳的一名同事介绍她们认识了对方。会议的第3天,卡彭蒂耶提议一起探索首府的老城区。沿着鹅卵石铺就的街道漫步时,两人开始谈论她们的研究。卡彭蒂耶询问杜德纳有没有兴趣合作——她是否愿意参与研究更加简单的化脓性链球菌2型系统中 Cas9的功能?
詹妮弗·杜德纳很感兴趣,她俩和同事们通过数字会议为这个项目制定计划。她们猜测, CRISPR-RNA 是识别病毒 DNA 所必需的,而 Cas9则是切断 DNA 分子的剪刀。然而,当她们在体外实验中测试时,切割没有发生,DNA 分子保持完整。为什么?是实验条件有什么问题吗?或者是 Cas9其实有着完全不同的功能?
经过大量的头脑风暴和无数次失败的实验,她们最终在实验中加入了 tracrRNA。在此之前,她们曾认为只有当 CRISPR-RNA 被切割成活性形式时,tracrRNA 才是必需的。但是一旦 Cas9遇上了 tracrRNA,每个人都在等待的事终于发生了——DNA 分子被切割成了两部分。
研究者常常惊叹于演化提供的解决方案,但这个东西依然是非同寻常的。链球菌已经演化出的这种对抗病毒的武器简单而有效,甚至可说是非常出色。基因剪刀的历史本可能就停在此处——有一种能给人类带来巨大痛苦的细菌,卡彭蒂耶和杜德纳发现了这种细菌体内的一个基本运行机制。这一发现本身就足够令人震惊,但准备充分的大脑还能抓住更稍纵即逝的机会。
一个划时代的实验
她们决定尝试去简化基因剪刀。利用关于 tracrRNA 和 crispr-RNA 的新知识,她们找到了将两者融合成一个分子的方法,并命名为引导 RNA。利用这种简化的基因剪刀,她们做了一个划时代的实验——研究是否可以控制这种基因工具,使其在研究者想要的位置上切割 DNA。
到了这个时候,她们知道自己即将取得重大突破。她们从杜德纳实验室的冰箱里拿了一个现成的基因,然后选择5个不同的位点去切割这个基因。然后,她们修改了剪刀的 CRISPR 部分,使其序列与将要裁剪的部分相匹配。结果是压倒性的大胜。DNA 分子在正确的位置,被精确地切割了。
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