【粤开医药深度】HER2ADC渐入收获期，星辰大海，砥砺前行(13)

（2）非天然氨基酸技术（Unnatural amino acid engineering）。非天然氨基酸技术由Peter G Schultz首创，其技术路线大致分为三步：首先，通过药物化学的方法，体外合成符合成药需求的天然氨基酸；其次，天然氨基酸在tRNA合成酶的作用下，与特殊的tRNA紧密连接，运送到合成蛋白质的核糖体；在核糖体中，tRNA会识别指定位置的特殊密码子，精准地将非天然氨基酸插入到多肽链的特定部位。这些定点插入的非天然氨基酸可给精准蛋白工程修饰提供巨大的化学空间。
安博生物/浙江医药联合研发的ARX788引入了非天然氨基酸p-acetylphenylalanine（pAF，含有酮反应官能团），通过肟键偶联毒素AS269，DAR为2。且pAF-AS269的肟键十分稳定，体内代谢产物仅有pAF-AS269，无游离毒素AS-269。实验数据显示，即使ADC药物已经被吞入细胞发生降解，ADC上的毒性药物分子仍然牢固与非天然氨基酸连接，展现出非天然氨基酸技术带来的超强稳定性。

（3）GlycoConnect技术。2019年4月，上海美雅珂生物与荷兰Synaffix公司签署协议，获得后者GlycoConnect技术的非排他性权益。GlycoConnect是一种偶联技术，可利用天然抗体聚糖实现定点偶联和稳定毒素附着，并可针对DAR1、DAR2或DAR4格式进行量身定制。
其技术原理为N297位点是抗体恒定区的N-糖基化经典位点。聚糖是很好的偶联位点，因其远离抗原结合位点，不影响抗体PK值。
GlycoConnect的技术路线主要有三步，首先，抗体通过糖苷内切酶（Endoglycosidase Endo S）切除N端聚糖，只剩下糖胺（GlcNAc）；第二步，Y289L突变的bovine β（1-4）-galactosyltransferase用来转运含叠氮（Azido）的糖到抗体；第三步，通过点击化学（ClickChemistry）反应drug-linker（药物-联接区）被偶联到抗体，最终产生DAR=2的ADC。点击化学的基本思想是利用碳-杂原子成键反应快速实现分子多样性，一般由叠氮化物和炔烃作用形成共价键，具有高效稳定、高特异性等优点。