【粤开医药深度】HER2ADC渐入收获期，星辰大海，砥砺前行(11)

（2）随机偶联和定点偶联
抗体连接毒素的个数（Drug-antibody ratio，DAR）决定了ADC药物的均一性。大部分临床试验的ADC药物的DAR在2-4之间。通常，DAR越高，ADC药物耐受性越低，半衰期越短，药物代谢速度和全身毒性越高，血浆清除率更高，在体内试验的效果也越差。
随机偶联：随机偶联可分为依靠赖氨酸的偶联和依靠半胱氨酸的偶联。在传统ADC药物的设计中，连接位点常选择赖氨酸或半胱氨酸。但由于每个抗体上均拥有数个至数十个氨基酸位点，导致在传统方法下，毒素药物的连接难以准确控制，产出的ADC药物均一性较差，为包含有效产物、无效产物和高度副作用产物的混合物。
（1）依靠赖氨酸的偶联选择性差，产品均一性不足。在payload与单抗的结合中，最早的方法是利用亲电基团，如马来酰亚胺或者N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和暴露赖氨酸的氨基反应。但是由于单个抗体上存在80-100个赖氨酸的氨基，其中约30个可供连接，因此反应呈现随机性，导致每个抗体上的毒素并不相同，产品不均一十分明显，这对于ADC药物的PD/PK等参数会产生较大的影响。在已上市的产品中，T-DM1、Mylotarg、Besponsa均使用此法偶联。

（2）依靠二硫键还原半胱氨酸的偶联仍会产生不均一的ADC产品。依靠二硫键还原半胱氨酸偶联是目前使用最多的偶联方式，Enhertu、Trodelvy、Adcetris均使用此法。单克隆抗体IgG含有12个链内二硫键和4个链间二硫键。链内二硫键由于处于抗体两层反向平行的β折叠结构之间，没有溶剂暴露，导致较低的反应性。链间二硫键高度暴露在溶剂区，在还原剂的作用下，可还原出8个具有亲核性能的巯基，进一步与连接着反应基团的毒素分子偶联，形成较为均匀、牢固的结构。但是，由于采用二硫键产生的ADC药物每个抗体最多含有8个有效负载，仍可能生产出不均一的ADC药物产品。