非编码RNA疗法，免疫原性、特异性、递送难题如何各个击破？(4)

特异性的障碍
RNA药物的质量主要取决于药物对靶点的特异性强度和存不存在脱靶效应。RNAi药物设计的发展已经提高了靶向特异性并减少了不需要的脱靶效应，但对非编码RNA药物尚未进行充分的研究。
RNA药物剂量是影响药物质量的另一个重要的因素。当使用miRNA模拟物和抑制剂时，剂量有额外的影响。一方面，miRNA靶向多种不同的mRNA；另一方面，每个mRNA靶点都受多个miRNA的调控，并且可能在附近拥有不同的miRNA结合位点，从而导致结合竞争。如果miRNA以竞争方式与靶点相互作用，单个miRNA水平的扰动将影响其他miRNA对mRNA的靶向。
下面是作者总结出的一些有希望的解决方法：
1. 细胞特异性miRNA调节
miRNA或miRNA抑制剂在非靶细胞中过度表达可能具有毒性，想要限制这种表达可以使用能被目标细胞中过度表达的某种启动子控制的载体来递送RNA药物。例如，MYCN是神经母细胞瘤中的致癌基因，将miRNA克隆到MYCN启动子控制下的载体中，可以实现治疗性miRNA在神经母细胞瘤细胞中的选择性表达。如果这一载体进入几乎不表达MYCN的非神经母细胞瘤细胞，则miRNA的表达将是最小的。需要注意的是，这种细胞特异性miRNA调节尚未在临床上应用，使用这种方法时应密切监测药物剂量。
2. “假”细胞特异性靶向
如果miRNA或lncRNA在患病细胞类型中特异性地过度表达，而在正常细胞类型中低表达，则可以应用“假”细胞特异性靶向。假定正常细胞中低表达转录物的下调不会产生强烈的不利影响，大部分lncRNA在正常细胞中以非常低的水平表达就是这种情况，因此反义疗法对正常细胞几乎没有影响（因此没有毒性）。
这种方法的临床应用需要对准确的非编码组织表达模式进行细致的临床前研究，尤其是一些非保守的、灵长类或人类特异性的转录本。
3. 使用环状RNA
环状RNA比线性RNA要稳定得多，许多环状siRNA不仅更稳定，而且介导的RNAi效应更有效，持续时间更长。环状化似乎克服了多个线性siRNA的障碍，表现出更低的免疫刺激、更高的稳定性和生物利用度，以及更高效的细胞摄取。
环状lncRNA（circRNA）的发现进一步拓宽了阻断致癌RNA功能的可能性。多项研究表明circRNA的失调与癌症、糖尿病和动脉粥样硬化等多种疾病有关。因此，内源性或合成的circRNA有可能被用作有效且高度稳定的疗法。