一区顶刊：国家肝癌中心用多组学技术解析双阳性细胞轨迹和特征(4)

图3 | DPT细胞的表型和功能
4. DPT 细胞存在于各种具有相似表型的人类癌症中，是 HCC 的重要预后因素
为了进一步确认 PD-1DPT 细胞在体内的空间分布，作者同时用 CD4/CD8/PD-1 抗体标记 HCC 组织，并检查 T 细胞在 T、L 和 N 区域的散发性浸润（图 4A）。与之前的结果一致（图 2C），CD8SPT 细胞主要位于 N 区，CD4 SPT 细胞主要位于 T 区。PD-1DPT 细胞在 T/N 区几乎看不到，在 L 区广泛存在，所有三种抗体的染色信号都很强。通过HALO软件计数PD-1DPT（三阳性）细胞数。作者发现 PD-1DPT 细胞在不同 HCC 患者的 L 区是可变的（图 4B），并且与 DPT 细胞的数量高度相关（图 4C）。
生存分析表明，更多的 DPT 细胞和 PD-1DPT 细胞显著表明更好的总体生存率和无复发生存率（图 4D）。但是，对于 T 或 N 区域，无法观察到该结果，提示DPT细胞可能在L区特异性发挥其功能。
为了进一步验证 DPT 细胞的存在和功能，分析了另外 30 例独立 HCC 病例和 10 例肝内胆管癌 (ICC) 病例以及之前报道的 70 例肾透明细胞癌 (RCC) 病例的 T 细胞谱。如以上部分所述，与 SPT 细胞相比，在所有三个数据集中都发现了具有更高免疫检查点标记表达的 DPT 细胞（图 4E）。为了扩展作者的发现，作者用 Hepa 1-6 细胞系验证了两种 HCC 小鼠模型（原位/皮下）中 DPT 细胞的存在（图 4F，G）。此外，PD-1 表达在鼠 DPT 中明显上调。总之，这些结果表明DPT细胞不仅存在于HCC中，还存在于其他肿瘤中。

图4 | DPT 细胞存在于具有相似表型的各种人类癌症中，并在 HCC 中显示出预后价值
5.B 单细胞 RNA-Seq 和 TCR-Seq 对肿瘤相关 DPT 细胞的表征